1、小丸子：故事主角，在学校担任小动物值日生、3年4组第三班长(第二辑第12至549集)；喜欢无理取闹、幼稚任性、爱和姐姐争吵；平时爱看《Ribbon》漫画和搞笑剧，但不爱运动、不收拾房间、爱睡懒觉、对功课不做和临时抱佛脚。时常耍小聪明、自恋，且爱占便宜、贪钱、贪新鲜，并粗心大意，是个拥有不少小缺点的女孩。最喜爱和小玉玩游戏，但遇到想学的事就半途而废，另外带给家人不少麻烦。有时性格倔强，不听别人劝告。偶像是山口百惠与山本琳达。
2、穗波玉：又名小玉，英文名Tammy。和小丸子一起坐在末座，两人是形影不离的知己。文静善良，喜欢帮助别人；天真单纯，时常幻想另一个自己。家境小康，卧室里的大床是小丸子最羡慕的东西。当她感觉小丸子与他人的关系比自己更好时，会感到些莫名的恐慌。父亲喜欢给她拍照，需要经常面对镜头使她很烦恼。
3、樱小竹：小丸子的奶奶。生性节俭，内敛稳重，是个爱惜孙女们的慈祥奶奶；对从前的习俗了解甚多，和妈妈一样爱储备无用的杂物；时常和爷爷一起参加老人活动，最喜欢爷爷的老实。口头禅是“我也活不了多久，最多再活三、五年”，实际上依然老当益壮。平时话不多，但会语出惊人，一语道破盲点，时常展现出意想不到的决断及能干。喜欢的花是君影草（铃兰）。年轻的时候是个大美人，被公认为是当地最美丽的女子，拥有“清水西施”之美誉。
4、樱早纪子／樱幸子／樱美子：又译幸子（原名“さきこ”，被误译成“さちこ”）、杏子、美子。小丸子的姐姐，与小丸子读同一所小学的6年级。因较懂事而受家人（樱友藏除外）偏爱，和小丸子的性格完全相反，较冷静成熟，但遇着郊游旅行和喜爱的明星时，就会手舞足蹈，遇上大减价时更会与妈妈陷入疯狂。爱编织，很讨厌运动。和小丸子常常吵架，但在小丸子遇到困难或危险时也会立刻挺身而出，最初的偶像是锦野明，后来喜欢西城秀树。
5、樱友藏：小丸子的爷爷，头部生得很像鸡蛋，溺爱小丸子到死，对她事事认同且处处维护她，所以常被小丸子利用。他每天把电视剧情节代入当今想像，对住小丸子常常死鸡撑饭盖，爱戴着草帽，拖着乌龟散步，喜欢吃软软的东西，不喜欢吃柿子饼。有点老人痴呆（记性不好），但有时又会为想一件事想很久，口袋里戴上写着地址的卡片。经常与奶奶参加老人活动，并买些奇怪的手信回家，还喜欢作奇怪的“友藏心之俳句”，其实毛笔字和水墨画都还不错。有一位不常拜访的但常畏畏缩缩的同侪朋友中野先生，每次拜访的举动也令小丸子一家人留下深刻印象。
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